热激法转化成功的原因
问题更新日期:2024-11-03 04:24:30
问题描述
热激法转化成功的原因急求答案,帮忙回答下
- 精选答案
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质粒转化时先在冰中放置半小时后再42度热激的原因:热激法:大肠杆菌在0℃ CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。在被转化的细胞中,重组子基因得到表达,在选择性培养基平板上可挑选所需的转化子。所以,预先需要先在冰水中旋转半小时。也可以用电转化法:外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定,形成电穿孔,不仅有利于离子和水进入细菌细胞,也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。
- 其他回答
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以下是我的回热激法转化成功的原因在于高温可以促进细胞吸收和表达外源基因。在热激条件下,细胞膜的通透性增加,外源基因更容易进入细胞内部。同时,热激可以激活细胞内部的基因表达系统,使外源基因得以表达。因此,热激法是一种有效的基因转移和表达方法,被广泛应用于基因工程和分子生物学研究中。
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