ihc切片是什么意思

问题描述

精选答案

IHC(石蜡切片)都有哪些步骤

一、 石蜡组织切片制作

固定：使组织样本尽量保持其离体前状态，多采用4%多聚甲醛固定液。

脱水：水和透明剂不能互溶，只有脱去水分后，才能让透明剂进入。使用梯度乙醇进行脱水。

75%、85%、95%、100%、100%乙醇，每步1h-2h左右。

透明：乙醇不能与石蜡相溶，还需用能与乙醇和石蜡相溶的媒浸液，替换出组织内的乙醇。二甲苯是常用的透明剂，可以很好地与石蜡互溶。将组织依次放入二甲苯与无水乙醇的等体积混合液、纯二甲苯和纯二甲苯中进行透明。

浸蜡与包埋：用石蜡取代透明剂，使石蜡浸入组织而起支持作用，便于在切片机上夹持切片。用于包埋石蜡的熔点在50~60℃之间。

切片：将包埋组织的蜡块固定在切片机上，切片厚度一般为4~8μM。

贴片：把切片放入50℃水中，摊平后用多聚赖氨酸处理过的载玻片捞起，室温晾干。