半干转膜原理

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精选答案

最近在做转膜，本人蛋白50kd左右，用的bio-red半干转膜仪，转膜缓冲液用是39mM甘氨酸，48mM Tris，20%甲醇，ＰＶＤＦ膜，严格按照转膜操作进行的，恒压１２Ｖ的话，电流一开始就过小，只有０.０２Ａ，功率直接显示为零，转膜半小时都转不过去。今天试了恒流转，用了０.０３Ａ的电流，电压慢慢上升快超过２５Ｖ，后来改用０.０２Ａ的电流，电压最大的时候达到２２Ｖ。但是染色还是没有条带。预染marker基本上转过去了。将转过后的胶重新染色，胶上很明显的有我的蛋白。