低温感受态的诱导条件

问题描述

精选答案

1. 低温可以减少DNA的热运动，有利于稳定DNA分子与细胞膜之间的吸附作用。这个应该比较好理解，因为Ca2+、DNA（负电）、细胞膜（LPS、负电）之间的静电作用是放热的，因此低温有利（勒夏特列原理）。

2. 低温可以稳定细胞膜上LPS系统上的“洞”，有利于DNA分子与这些洞吸附，从而促进细胞吸收DNA分子。

3. 低温（0℃）与热激温度（42℃）之间的温度差改变细胞膜流动性，促进已吸附的DNA分子吞入。

4. 低温下DNA分子的构象可以保护DNA免受DNase分解。

虽然热激时间过长（optimal 30s）或者温度过高（optimal 42℃）确实会降低转化效率，推测原因是降低细胞生存率，但并没找到说第一步冰浴与细胞survival有关的。应该说，细胞膜的修复是主要在转化的复苏步（37℃)中发生的，因此不能说感受态细胞处于室温下容易死。