Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液区别打吗

问题描述

精选答案

从缓冲液的角度来看，他们对你的蛋白应该没有什么影响。

不同的是2种缓冲液的缓冲能力和pH范围不一样，由各自的pKa决定的。HEPES pKa在7.55，使用范围pH 6.5-8.5。Tris为弱碱，在室温（25℃）下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲 范围在pH7.0到9.2之间。需要注意的是温度对Tris buffer的pH影响很大, Tris缓冲液（如10mM pH8.3@25℃）Ph对温度敏感（25℃与72℃差异较大），HEPES的PH对温度基本无变化 一个是离子缓冲体系，一种是非离子缓冲体系